C.82bis- Therapeutic Protocol defended by the "POSITIFS" Association.
Replacement of HAART by a low toxicity treatment involving new targets of HIV, in patients intolerant to protease inhibitors or resistant to anti-integrase or seeking a less toxic treatment

Introduction

Although the main objective of zero or undetectable viral load is achieved by a treatment based on protease inhibitors and / or anti-integrase, demonstrating their effectiveness, these treatments are still imperfect because of their toxicity and side effects resulting from these two options:
1) Lipodystrophy, for anti-proteases, threatening the long-term development of cardiovascular complications and increased mortality risk significantly, or
2) ineffectiveness of anti-integrase
and forcing them to ascertain whether there is another possible treatment option, but that it must be found, in the case of former patients who have exhausted all the "arms" of the armamentarium of Pharmaceutical Companies.

The absence of alternative therapeutic option in these two impasses is especially urgent the discovery of new efficient and especially non-toxic treatments that can take over in case of major side effects (lipodystrophy). Ideally, a completely harmless armamentorium, since the patient must undergo treatment for life, and who nonetheless remain 100% effective, that is to say capable of maintaining an undetectable viral load: An ideal treatment.

Basis of the proposal of clinical research protocol:

A) Biological Requirements

1) work of Bandivdekar  on Mannose receptor and Tran GMK work on sodium channel voltage-dependent, both co-receptors for HIV non-target date by Pharmaceutical Companies.
The mechanism of action at the molecular biology is blocking the virus  at the entry into the cell, by targeting these two new receptors (different from CD4, CCR5 and CXCR4):
a) The mannose receptor and
b) The receptor whose ligands  are gp120, gp41, Nef and part scorpion-like protease (Tran GMK, work submitted, not yet published), this receptor is the sodium channel voltage-dependent or receptor long scorpion venom toxin.
Blocking the sodium channel was already successfully completed and published (Fredj and Dietlin, society Newpharm) in 1989, clinically with Tacrine (tetrahydroaminoacridine or THA), which acts specifically on the sodium channel (Schauf and Sattin), but hepatotoxicity of Tacrine had prevented the increase in dose until the optimal dose (ie beyond 150 mg / day), resulting in a modest effect if real and an obligation to properly navigate the pitfalls of hypertransaminémia. The first test with Tacrine on a series of only a few patients had used doses too low (test of English Mike Youle) and was quickly abandoned.
This concept of the scorpion venom toxin model was developed from 1988-1989 by Tran MKG and also simultaneously by Werner in Germany (published in AIDS, see Garry RF editorial citing, with my permission, my alignments) . The European AIDS Clinical Society (EACS) was also elected as a member of its Scientific Council for about 10 years, Tran GMK for his decisive contribution to this discovery while to actually innovative, but considered a little "magic "for the time. It must be said that at the time, astrologers claimed that the AIDS epidemic had become following the merger of Pluto (planet of Scorpio) Earth (see Daily Doctor). They also predicted that the epidemic would decline gradually as and when the distance of Pluto, which ... has been achieved.
This closed unscientific astrological parenthesis, it is the work of very pure molecular biology have revealed very highly significant molecular mimicry between the scorpion toxin and HIV-1. This is not an astrological demonstration based on "influence" of Pluto on Earth.
A poisonous toxin is a molecular mimic virus has already demonstrated in the case of rabies and snake neurotoxin Naja (Lentz, Science). There is nothing there astrological, it's totally simple scientific toxinology. Still regarding rabies, we confirmed the presence of a second snake neurotoxin at residue Arg 333 (Tran GMK, unpublished), thus explaining the two clinical forms of rabies.
 
Confirmation of the concept of scorpion toxin by the Thai RV144 vaccine

This vaccine provides a low final protection  of  about 30%, but mainly
evident at the beginning of the test (probably because HIV-1 has not yet had time to mutate): Statistically, the 30% protection was questioned later, however, the fact remains that the difference is very significant at the beginning of the trial, with significantly more than 30% protection.

Recently, therefore, there has been an unexpected confirmation of the concept of voltage-gated sodium channel and toxins binding to the channel, the scorpion toxin: In fact, the first anti-AIDS vaccine in the world have had an efficiency (. Rerks-Ngarm S et al, NEJM, 2009) after more than a hundred failures, the recent Thai RV144 vaccine is - we now know - by an immunological mechanism targeting precisely, and only, the V1 and V2 loops of the gp120 of the envelope of HIV-1;

The correlate of vaccine protection is humoral: neutralizing antibody loops V1 and V2.

But these two hypervariable loops are well known by TRAN GMK, who had studied under the scorpion toxin, as well as the V3 loop (TRAN GMK): This work is not yet published, but V1 and V2 are also cone sea toxins (for the Thai vaccine strain) and scorpion (for the MN strain). This discovery was made in 1994 for the MN strain, but its meaning at the time was only to reinforce the concept of scorpion toxin obtained with mimicry between V3 and scorpion venom of Androctonus Australis Hector Aah II that Marc Girard had confirmed on the animal discovering  that anti-V3 antibodies protected chimpanzees, though specific type only.
Now, the success of the RV144 Thai vaccine, UNDISPUTED AT THE BEGINNING, however modest or no in the end, allows to suggest that the protection afforded to a clear mechanism: Neutralization of V1 and V2 loops of antibodies. One knows the type of immunity: Humoral alone, without the intervention of cellular immunity, especially the target antibodies are precisely known: the V1 and V2 loops of the gp120 envelope of HIV-1. Therefore, as these loops are cone sea and scorpion toxins, that means they bind to the voltage-gated sodium channel that is the receptor of two toxins, both the toxin of the cone and the toxin long  of the scorpion.
In short, to sum up, one of the "correlates of protection", so mysterious and so sought in vain for decades, in the anti-AIDS vaccine is an antibody binding to the hypervariable loops V1 and V2 gp120, and these two loops are  toxins cone sea (for the Thai vaccine strain) and scorpion (for the MN strain) binding to the sodium channel. This channel is the therapeutic target of omega-3. (Isbilan Banu 2006 Marchioli R 2002 study Gissi).


Give omega 3  leads to inhibit V1, V2 and V3 loops of gp120 and gp41 of HIV-1.

2) Work on Resveratrol
Zhang HS (anti-Tat activity) of
Heredia (synergy with nucleoside analogues) and
Tran GMK (anti-Nef activity, results presented at the 17th Post ISHEID Marseille  and on www.positifs.org C77). Nef acts on the CD4 count, the CD4/CD8 ratio and as Nef  represents 85% of the mRNA of a person infected with HIV-1 cell, on the other hand is a "superantigen" (which amplifies 10 000 times the action of the virus), inhibit Nef will be crucial to overcome AIDS.
Anti-Nuclear Factor kappa B activity (NFkB) of resveratrol suggests it will have a preventive effect on the occurrence of cancer, which is a sword of Damocles over the long term AIDS patients. Among other anti-NF- kB there is turmeric, Epi gallo catechin-3-gallate (EGCG) in green tea. So these are anti-cancer drugs, but also simultaneously anti-Nef. Their use is a double benefit for the patient: Prevent HIV-1 to act, particularly increasing the rate of CD4 (since Nef decreases the rate) and prevent the occurrence of cancer.
This is not mere speculation of a molecular biologist locked in his ivory tower, but a clinic is authenticated by clinical studies published in the international literature: The anti-NF-kB molecules such as green tea ( EGCG) have been studied in lung cancer of smokers in January 2009 on 700 smokers Coronado (USA): EGCG reduces the risk 15 times. Similarly, the fungi associated with green tea reduced by 85% the risk of breast cancer in a 2009 study involving 1,000women.
About lung cancer, AIDS as it affects the rest of the population, and therefore the interest of EGCG is major. This suggests that we should study the incidence of cancer as "end point" in AIDS patients taking anti-NF-kB, to determine whether a cancer preventive effect.


IN SUMMARY

The attack HIV-1 virus is a crossfire (as in defenses Vauban fortifications): The abuser HIV-1 is subjected to heavy fire from four different directions simultaneously attack is:
-gp120(theD-Mannose)
-Nef and Tat (by resveratrol)
-Reverse Transcriptase (with 3TC) and
-envelope glycoprotein (gp120, gp41) (for the omega-3).
Note that the Omegaven is an IV infusion of omega-3, used in parenteral lipid diet.

Clinical confirmation


1) In addition to the former work Fredj G and Dietlin in 1989 on the inhibition at the sodium channel (the Tacrine)

2) Results of one of us (Adrien Caprani) with combination therapy (3TC, Resveratrol, D-Mannose, Omacor) Poster presented in the 17th ISHEID Marseille (C75 and C75bis on www.postifs.org) . This treatment alone can maintain an undetectable viral load for 10 months, no significant changes in CD4 (504 + / -15 vs. 492 + / -30) *, with a slight
increased CD4/CD8 ratio (0.61 vs. 0.50), normalization of activated T (7% vs. 15%) and a significant increase in natural killer (NK) cells (24% v 8%).
* NB The last digit of CD4 is very favorable, with a climb of about 700 to ~ 550-600 (August 2012). The "stall" ascending was not known and had not been published at the time of ISHEID Conference in Marseille.
2) The objective, given the upward momentum of CD4 would get 300 more CD4 or CD4 in 1000, or normal count, that is to say, the complete recovery of the patient, improving the current treatment in August 2012 by several complementary therapies;
A more powerful protocol theoretically include, in addition to four other (3TC + Resveratrol + D-Mannose + Omega-3) harmless nutraceuticals part somehow the daily diet.

3) 4 nutraceuticals are possible:
- Green tea (EGCG), anti-NF-kB
- A spice, turmeric (anti-integrase), which is not properly absorbed  if not associated with black pepper (WARNING!)
- Traditional African Herbal Medicine: Herbal Alternanthera pungens (Djohan YF, 2009, Ann Biol Clin 67: 563-8)
- TRIPHALA MIX (containing Arura) Tibeto-Ayurvedic (TRAN GMK, unpublished)

A fifth-requires prior virologic study to test SPECIFICALLY against HIV-1: The grapefruit seed extract (about 800 active pathogens: viruses, bacteria and fungi).
One-sixth candidate is sodium salicylate, anti-NF-kB, which inhibits HIV-1. A derivative of the second generation was recently synthesized in the U.S. to avoid side effects.


CRITERIA FOR INCLUSION:


Patients intolerant to protease inhibitors and / or non-responders to anti-integrase.
Patients responding to standard treatment with undetectable viral load.

Absence of the 184 mutation in reverse transcriptase (3TC resistance mutation)

Number of participants: 300 in three groups of 100 patients

Test duration: 1 year

Treatment groups:
First and second groups: 100 patients intolerant to protease inhibitors (group 1) and
100 patients intolerant / RESISTANT anti-integrase (second group)

Combined therapy
3TC (150 mg 2/day in 2 doses) +
Resveratrol | Biotivia Transmax TR (500 mg 2/day in 2 doses)]
D-Mannose (3g/day in 3 doses)
Omega-3 [Omacor (2g/day in 2 doses)]
for two types of patients

3rd group: conventional treatment with drugs first line or second line until an undetectable viral load, and when it is achieved, immediate replacement with 3TC + Resveratrol + D-Mannose + Omacor (n = 100 patients responding to standard therapy with undetectable viral load) to prevent the occurrence of side effects.

Patient monitoring
CD4 and CD4/CD8 ratio, viral load + standard blood parameters at 1 month, 3 months, 6 months, 12 months
Activated T cells and natural killer (NK) at 0, 6 months, 12 months

Evaluation of the protocol and expected results for the-3 treatment groups:

Group 1: For patients unresponsive to standard treatments, maintaining undetectable viral load and maintaining or increasing CD4
Groups 2 and 3: For patients intolerant to protease inhibitors and / or anti-integrase return to undetectable and increased CD4.
Disappearance of lipodystrophy in group 2 (after stopping protease inhibitors)
Absence or decrease the severity of the cancer or cancer risk in the 3 groups.



Protocol prepared jointly by:

- Guy Mong Ky TRAN (European AIDS Clinical Society (EACS) Scientific Council Member, and University of Auvergne, Department of Public Health (Pr Laurent GERBAUD) Hôtel-Dieu Hospital of Clermont-Ferrand.
- Adrien CAPRANI (CNRS, Paris), EACS and IAS member

C.82- Protocole Thérapeutique de « Positifs ».Remplacement par un traitement peu toxique impliquant de nouvelles cibles du virus HIV chez des patients intolérants aux anti-protéases ou résistants aux anti-intégrases ou souhaitant un traitement moins toxique.

Introduction

Bien que l'objectif majeur d'une charge virale nulle ou indétectable soit atteint par un traitement basé sur les anti-protéases et/ou anti-intégrases, témoignant de leur efficacité, ces traitements restent encore imparfaits du fait de leur toxicité et des effets secondaires principaux consécutifs à ces 2 options :

1. Lipodystrophies, pour les anti-protéases, menaçant le pronostic vital à long terme par l'apparition de complications cardio-vasculaires et augmentant le risque de mortalité de façon significative, ou
2. inefficacité de l'anti-intégrase,

et obligeant à rechercher s’il existe une autre solution thérapeutique envisageable, sans que celle-ci soit obligatoirement trouvée, s'agissant de malades anciens ayant épuisé toutes les « armes » de l'arsenal thérapeutique des Compagnies Pharmaceutiques.

L'absence d'option alternative dans ces 2 impasses thérapeutiques rend particulièrement urgente la découverte de nouveaux traitements efficaces et surtout non toxiques qui puissent prendre le relai en cas d'effets secondaires majeurs (lipodystrophies). L'idéal serait un armamentorium totalement inoffensif, puisque le malade doit suivre un traitement à vie, et qui malgré cela resterait à 100% efficace, c'est-à-dire capable de maintenir une charge virale indétectable : Un traitement idéal.

Objectifs :

1. 1)Présenter une alternative thérapeutique curative pour des patients déjà devenus intolérants aux anti-protéases (lipodystrophies) et/ou résistants aux anti-intégrases.

1. 2)Présenter une alternative thérapeutique préventive pour des patients non encore devenus intolérants aux anti-protéases et/ou anti-intégrases: Offrir une possibilité de traitement efficace et peu toxique à des patients déjà traités avec succès (charge virale indétectable) avec les trithérapies conventionnelles, mais en arrêtant leur traitement suffisamment tôt pour le remplacer par l'alternative présentée ici. L'arrêt doit survenir dès l'obtention d’une charge virale indétectable, avant que l'effet secondaire n'ait eu le temps de se développer (lipodystrophie) : Il s'agit de prévention de l'effet secondaire. Ce remplacement ou « shift » conserve l'efficacité (charge virale nulle), mais empêche l'apparition des effets secondaires : C'est le traitement idéal.

Bases de la proposition du protocole de recherche clinique :

A) Pré-requis biologique

1) Travaux de Bandivdekar sur le récepteur au Mannose et travaux de Tran GMK sur le canal sodique Na+ voltage-dépendant, tous deux co-récepteurs du HIV non ciblés jusqu’ici par les Compagnies Pharmaceutiques.

Le mécanisme d'action au niveau de la biologie moléculaire est le blocage du virus au niveau de l'entrée dans la cellule, en ciblant ces 2 nouveaux récepteurs (différents du CD4, du CCR5 et du CXCR4):

a) Le récepteur au Mannose et

b) Le récepteur qui a pour ligands le gp120, le gp41, Nef et la partie scorpion-like de la protéase (Tran GMK, travail soumis, non encore publié), ce récepteur étant le canal sodique Na+ voltage-dépendant ou récepteur de la toxine longue du venin de scorpion.

Le blocage du canal sodique avait déjà été réalisé avec succès et publié (Fredj et Dietlin, de la société Newpharm) en 1989, cliniquement avec la Tacrine (TétraHydroAminoacridine ou THA), qui agit spécifiquement sur le canal sodique (Schauf et Sattin), mais l'hépatotoxicité de la Tacrine avait empêché l'augmentation des doses jusqu'à l'obtention de la dose optimale (c'est-à-dire au delà de 150 mg/jour), entrainant un effet modeste même s'il est réel et une obligation de bien naviguer entre les écueils de l'hypertransaminémie. Le tout premier essai avec la Tacrine sur une série de quelques malades seulement avait utilisé des doses trop faibles (essai Anglais de Mike Youle) et avait été très rapidement abandonné.

Ce concept du modèle de la toxine du venin de scorpion avait été développé dès 1988-1989 par Tran MKG et aussi simultanément par Werner en Allemagne (publié dans AIDS ; voir l'éditorial de Garry R.F. qui cite, avec mon autorisation, mes alignements). L' European Aids Clinical Society (E.A.C.S.) a d'ailleurs élu comme membre de son Conseil Scientifique, pendant environ 10 ans, Tran GMK pour sa contribution décisive à cette découverte tout-à-fait innnovante, mais plutôt considérée comme un peu « magique » pour l'époque. Il faut dire qu'à l'époque, des Astrologues affirmaient que le Sida était devenu épidémique à la suite du rapprochement de Pluton (planète du scorpion) de la Terre (voir le Quotidien du Médecin). Ils avaient aussi prédit que l'épidémie déclinerait progressivement au fur et à mesure de l'éloignement de Pluton, ce qui … s'est depuis réalisé.

Cette parenthèse astrologique non scientifique fermée, ce sont mes travaux de très pure biologie moléculaire qui ont mis en évidence le mimétisme moléculaire très hautement significatif entre la toxine de scorpion et le VIH-1. Ce n'est pas une démonstration astrologique, basée sur « l'influence » de Pluton sur la Terre.

Qu’une toxine venimeuse soit mimétique moléculaire d’un virus est déjà démontré, dans le cas du virus de la rage et de la neurotoxine de serpent Naja (Lentz, Science) : Il n’y a là rien d’astrologique, c’est de la simple toxinologie totalement scientifique. Toujours en ce qui concerne la rage, nous avons confirmé la présence d’une 2^ème neurotoxine de serpent au niveau du résidu Arg 333 (Tran GMK, non publié), expliquant ainsi les 2 formes cliniques de rage.

Confirmation du concept de la toxine de scorpion par le vaccin Thailandais RV144

Ce Vaccin donne une protection finale faible d’environ 30%, mais surtout évidente au début de l’essai (probablement du fait que le VIH-1 n’ait pas encore eu le temps de muter) : Statistiquement, le chiffre de 30% a été remis en question ultérieurement, cependant, il reste que la différence est très significative au début de l’essai, avec une protection nettement supérieure à 30%.

Récemment, donc, on a eu une confirmation inattendue du concept du canal sodique voltage-dépendant et des toxines se fixant sur ce canal, dont la toxine de scorpion : En effet, le premier vaccin anti-Sida au monde ayant eu une efficacité, après plus d'une centaine d'échecs, le récent vaccin Thaïlandais RV144 (Rerks-Ngarm S et col., NEJM, 2009) agit - on le sait maintenant - par un mécanisme immunologique ciblant très précisément, et seulement, les boucles V1 et V2 de la gp120 de l'enveloppe du VIH-1 ;

Le corrélat de protection du vaccin est humoral : Anticorps neutralisant les boucles V1 et V2.

Or ces 2 boucles hypervariables me sont bien connues, car je les avais étudiées dans le cadre de la toxine du scorpion, au même titre que la boucle V3 (TRAN GMK) : Ce dernier travail n'est pas encore publié, mais V1 et V2 sont aussi des toxines de cône de mer (pour la souche Thaïlandaise du vaccin) et de scorpion (pour la souche MN) (voir la feuille séparée accompagnatrice). Cette découverte avait été faite dès 1994 pour la souche MN, mais sa signification à l'époque était seulement de renforcer le concept de la toxine de scorpion obtenu avec le mimétisme entre V3 et le venin de scorpion d'Androctonus Australis Hector AaH II, que Marc Girard avait parallèlement confirmé sur l'animal en découvrant que les anticorps anti-V3 protégeaient le chimpanzé, quoique de manière type spécifique seulement.

Maintenant, le succès du vaccin Thaïlandais RV144, INDISCUTABLE AU DEBUT, même s'il est modeste voire nul au final, permet d'avancer que la protection conférée a un mécanisme bien clair : La neutralisation des boucles V1 et V2 par des anticorps. On connait donc le type d'immunité : Humoral seul, sans intervention de l'immunité cellulaire, et surtout on connait très précisément les cibles des anticorps : les boucles V1 et V2 de la gp120 de l'enveloppe du VIH-1. Par conséquent, comme ces boucles sont des toxines de cône de mer ou de scorpion, cela veut dire qu'elles se fixent sur le canal sodique voltage-dépendant qui est le récepteur des 2 toxines, à la fois la toxine du cône et la toxine longue de scorpion.

 En clair, pour nous résumer, l'un des « corrélats de protection », si mystérieux et tant recherchés en vain depuis des décennies, dans le cadre du vaccin anti-Sida, est une fixation des anticorps sur les boucles hypervariable V1 et V2 de la gp120, et ces 2 boucles sont des toxines de cône de mer (pour la souche Thaïlandaise du vaccin) et de scorpion (pour la souche MN) se fixant sur le canal sodique. Ce canal est la cible thérapeutique de l’oméga-3.

Donner de l’oméga 3 revient à inhiber les boucles V1, V2 et V3 de la gp120, ainsi que le gp41 du VIH-1.

1.  2)Travaux sur le Resvératrol de

Zhang HS (activité anti-Tat), de

Heredia A (synergie avec les analogues nucléosidiques) et de

Tran GMK (activité anti-Nef, résultat présenté en Poster au 17e  ISHEID de Marseille C77 sur ce site). Nef agit sur le taux de CD4, sur le ratio CD4/CD8 et comme Nef d'une part représente 85% des ARN messagers d'une cellule infectée par le VIH-1, d'autre part est un « superantigène » (qui amplifie de 10 000 fois l'action du virus), inhiber Nef va donc être crucial pour vaincre le Sida.

L'action anti-Nuclear Factor kappa B (NFkB) du Resvératrol permet de penser qu'il aura une action préventive sur la survenue des cancers, qui constitue une épée de Damoclès sur le long terme des Sidéens ; parmi les autres anti-NF-kB il y a aussi le curcuma, l'Epi Gallo Catéchine-3-Gallate (EGCG) du thé vert. Ce sont donc des molécules anti-cancéreuses, mais aussi simultanément anti-Nef. Leur utilisation est donc d'un bénéfice double pour le malade : Empêcher le VIH-1 d'agir, et en particulier augmenter le taux de lymphocytes CD4 (puisque Nef diminue ce taux) et prévenir la survenue des cancers.

Ce n'est pas une pure spéculation d'un biologiste moléculaire enfermé dans sa Tour d'Ivoire, mais un fait clinique authentifié par des études cliniques publiées dans la littérature internationale : Les molécules anti-NF-kB comme par exemple le thé vert (EGCG) ont été étudiées dans le cancer du poumon des fumeurs en Janvier 2009 sur 700 fumeurs à Coronado (USA): l'EGCG réduit le risque de 15 fois. De même, le thé vert associé aux champignons réduit de 85% le risque de cancer du sein dans une étude de 2009 portant sur 1000 femmes.

Concernant le cancer du poumon, il touche les sidéens comme le reste de la population, et donc l'intérêt de l'EGCG est majeur. Ceci suggère qu'il faudrait étudier la fréquence des cancers comme « end point » chez les sidéens prenant des anti-NF-kB, afin de déterminer s'il y a un effet anti-cancéreux préventif.

                                                                                                                                      EN RESUME

L'attaque du virus VIH-1 est un tir croisé (comme dans les défenses des fortifications de Vauban): L'agresseur le VIH-1 est soumis à un feu nourri venant de 4 directions différentes ; l'attaque vise simultanément:

la gp120 (par le D-Mannose),

Nef et Tat (par le Resvératrol),

la Réverse Transcriptase (par le 3TC) et

la glycoprotéine d'enveloppe (gp120, gp41) (par l'Oméga-3).

On notera que l’Omegaven est une perfusion I.V. d’oméga-3, utilisée en alimentation lipidique parentérale.

Confirmation clinique

1) Outre les travaux anciens de Fredj G et Dietlin en 1989, portant sur l'inhibition    au niveau du canal sodique (par la Tacrine),

2)Résultats obtenus sur l’un d'entre nous (C.A.) avec la polythérapie (3TC, Resvératrol, D-Mannose, Omacor), présentés en Poster au 17e  ISHEID de Marseille(C75 et C75bis sur ce site). Ce traitement à lui tout seul permet le maintien d'une charge virale indétectable pendant 10 mois, sans modification significative des CD4(504+/-15 vs 492+/-30)*, avec une légère augmentation du rapport CD4/CD8(0,61 vs 0,50), une normalisation des T activés(7% vs 15%) et une forte augmentation des Natural Killers (NK)(24% v 8%).

*N.B.Le dernier chiffre de CD4 est très favorable, avec une montée d'environ ~550-600 jusqu'à 700 (Août 2012). Ce « décrochage » ascendant n'était pas encore connu et n'avait pas été publié au moment de la Conférence ISHEID à Marseille.

  L'objectif, au vu de la dynamique ascensionnelle des CD4, serait d'obtenir 300 CD4 de plus, soit 1000 CD4, ou chiffre normal, c'est-à-dire la guérison complète du malade, en améliorant le traitement actuel d'Août 2012 par plusieurs traitements complémentaires ;

Un protocole théoriquement plus puissant inclurait, en plus des 4 autres (3TC+Resvératrol+D-Mannose+Oméga-3) des alicaments inoffensifs faisant partie en quelque sorte de l’alimentation quotidienne.

 4 alicaments sont envisageables :

- Du thé vert (EGCG), anti-NF-kB

- Une épice, le Curcuma (anti-intégrase), qui n’est correctement absorbé qu’associé au poivre noir  (ATTENTION!)

- Phytothérapie traditionnelle africaine : Tisane d’Alternanthera pungens(Djohan YF, 2009, Ann Biol Clin, 67 : 563-8)

- TRIPHALA MIX (contenant l’Arura) tibéto-ayurvédique (TRAN GMK, non publié)

 -Un 5^ème nécessite une étude virologique préalable, pour le tester SPECIFIQUEMENT contre le VIH-1: L’huile essentielle de pépin de pamplemousse (actif sur 800 pathogènes: Virus, bactéries et champignons).

-Un 6^ème candidat est le salicylate de sodium, anti-NF-kB qui inhibe le VIH-1. Un dérivé de 2^ème génération a été synthétisé récemment aux USA pour éviter les effets secondaires.

Critères d'inclusion :

Patients intolérants aux anti-protéases et/ou non répondeurs aux anti-intégrases.

Patients répondant à un traitement standard avec charge virale indétectable.

Absence de la mutation 184 de la reverse transcriptase (mutation de résistance au 3TC)

Nombre de participants : 300, en 3 groupes de 100 patients

Durée de l'essai : 1 an

Traitement des groupes :

1er et 2ème groupes : 100 patients intolérants aux anti-protéases (1er groupe) et

100 patients intolérants/RESISTANTS aux anti-intégrases (2ème groupe)

3TC (150 mg 2/jour en 2 prises) +

Resvératrol |Transmax TR de Biotivia (500 mg 2/jour en 2 prises)] +

D-Mannose (3/jour en 3 prises) +

Oméga-3 [Omacor (2g/jour en 2 prises)]

pour les 2 types de patients

3ème groupe : Traitement conventionnel avec des médicaments de 1ère ligne ou 2ème ligne jusqu'à l'obtention d'une charge virale indétectable, puis dès celle-ci obtenue, remplacement immédiat par le 3TC+Resvératrol+D-Mannose+Omacor (n=100 patients répondant aux traitements standards avec charge virale indétectable) pour éviter l'apparition d'effets secondaires.

Suivi : CD4 et ratio CD4/CD8, charge virale + paramètres sanguins standards à 1 mois, 3 mois, 6 mois, 12 mois

 Lymphocytes T activés et Natural Killers (NK) à 0, 6 mois, 12 mois

Evaluation des traitements- résultats attendus pour les 3 groupes:

Groupe 1 : Pour les patients répondant aux traitements standards, maintien de l'indétectabilité de la charge virale et maintien ou augmentation des CD4

Groupes 2 et 3 : Pour les patients intolérants aux anti-protéases et/ou anti-intégrase, retour à l'indétectabilité et augmentation des CD4.

Disparition des lipodystrophies pour le groupe 2 (après arrêt des anti-protéases)

Absence, ou diminution de la gravité du cancer, ou du risque de cancer, dans les 3 groupes.

Protocole rédigé conjointement par:

 -       Guy Mong Ky TRAN (European Aids Clinical Society (E.A.C.S.) Scientific Council Member, et Université d'Auvergne, Département de Santé Publique (Pr Laurent GERBAUD) de l'hôpital Hôtel-Dieu de Clermont-Ferrand.

-     Adrien CAPRANI (CNRS, Paris)

Ce protocole a été presenté le 19 Juin 2013 au Groupe"Stratégies Thérapeutiques Antirétrovirales" de l’ANRS à la demande du Professeur Delfraissy, Directeur de l’ANRS après que Positifs lui ai transmis en Juillet 2012  les bases de ce protocole.

Le groupe coordonné par le Professeur Catherine Katlama à jugé que des essais in vitro sur l’activité anti HIV du mannose et de l’oméga 3 manquaient dans le projet pour le mettre en œuvre.

Il est stupéfiant que ces essais complémentaires soient demandés à une association de patients, sans laboratoire de recherche et sans moyens financiers, alors  le groupe Stratégie qui nous a auditionné  comporte des responsables de laboratoires compétents pour réaliser ces essais de coût dérisoire que l’ANRS peut financer dans le cadre de ses missions!

Remplacement par un traitement peu toxique impliquant de nouvelles cibles

du virus HIV chez des patients intolérants aux anti-protéases ou résistants aux

anti-intégrases ou souhaitant un traitement moins toxique

Introduction

Bien que l'objectif majeur d'une charge virale nulle ou indétectable soit atteint par un traitement basé sur les anti-protéases et/ou anti-intégrases, témoignant de leur efficacité, ces traitements restent encore imparfaits du fait de leur toxicité et des effets secondaires principaux consécutifs à ces 2 options :

et obligeant à rechercher s’il existe une autre solution thérapeutique envisageable, sans que celle-ci soit obligatoirement trouvée, s'agissant de malades anciens ayant épuisé toutes les « armes » de l'arsenal thérapeutique des Compagnies Pharmaceutiques.

L'absence d'option alternative dans ces 2 impasses thérapeutiques rend particulièrement urgente la découverte de nouveaux traitements efficaces et surtout non toxiques qui puissent prendre le relai en cas d'effets secondaires majeurs (lipodystrophies). L'idéal serait un armamentorium totalement inoffensif, puisque le malade doit suivre un traitement à vie, et qui malgré cela resterait à 100% efficace, c'est-à-dire capable de maintenir une charge virale indétectable : Un traitement idéal.

Objectifs :

C.79-Hepatitis C virus and type 2 diabetes: Molecular homology between HCV E2 envelope and glucagon

Poster39 presented at the Viral Hepatitis Conference, March 25-26 2013, New York Academy of Science, New York, USA

TRAN GMK

31 avenue du bois, 92290Chatenay Malabry, France

Association « Positifs » BP 230,75865 Paris Cedex 18

                                                                                                 Background

200 millions people were infected with HCV in the world. Prevalence of type 2 diabetes in chronic HCV ranges 24-50%, a frequency 5 times greater than the rest of hepatic cirrhosis. Prevalence of hepatitis C among diabetes is 5 to 12%, versus 0.1 to 2% in the general population (Mehta SH, 2001). A direct involvement of HCV core has been hypothetized inducing a high level of Tumor Necrosis Factor-alpha and suppression of tyrosine phosphorylation of insulin receptor substrate-1 (Shintani Y, 2004).

We analyse the mechanism of action of HCV in diabetes/insulino-resistence production.

                                                                                                   Methods

Basic Local Alignment Search Tool Protein (BLASTP) comparison between human glucagon and HCV proteins [followed by visual examination of 2073 HCV (genotypes 1, 2, 3, 4, 5 and 6) E2 envelopes from the European database  of Pr Gilbert Deleage (Lyon) (euhcvdb.ibcp.fr)], and analysis of glucagon structure-function relationship and three-dimensional (3D) structure (Koth CM, 2012).

                                                                                                  Results

We found a homology between human glucagon, especially miniglucagon (19-29),

and HCV E2 protein chimera; the glucagon motif  H……………RR..DFVQ   W LM

was conserved in HCV E2 motif                                 H… … …….RR..DF .QGW.PI,

including the complete receptor binding motif located at the COOH-terminus and containing the residues D15, A19, F22, W25, L26, M27, T29 (M27 replaced by I; and linearly D15 is missing, A19 replaced by V):

Receptor binding residues    * * * * * * *

Numbering                             15      19   22     25262729

Glucagon                           15-DSRRAQDFVQ-W-LMNT-29

HCV E2  chimera               459-CRRVE DFVQGWGL I N-473

HCV E2 variant                                                                      T-474

17-RR-18 is a protease cleavage site.

The 2 gaps for glycines G (=Gly) are also encountered in a phylogenetically related glucagon in insects, the Adipokinetic Hormone pQVNFTPGWGTG (Gade G, 1997; Tran GMK, 2011), an 11 residues long peptide, which possesses the GWG motif of HCV E2.

Adipokinetic Hormone              pQVNFTPGWGT                                 (pQ = pyroGlu)

HCV 2b E2                                    E-  DFRI GWGT

Mini-glucagon (19-29) AQDFVQWLMNT  is 1000 fold more powerful than glucagon itself (Dalle S, 2002). It is a very potent (ID50 close to 0.1 pmol/l) inhibitor of insulin release from beta-cell.

The glucagon (1-21) and des-(22-26) glucagon have potencies of <0.0001% and 0.0006% respectively (Frandsen EK, 1985, 1981) pointing to the crucial role of the short 22-FVQWLMNT-29 COOH-terminus.

In fact, the 3D structure of mini-glucagon is an alpha-helix, so in the space glucagon A19 is near F22, and if we consider this spatial glucagon helical A19-F22 proximity, HCV E2 contains an Alanine A464 near F465, matching with the glucagon A19 and F22; HCV contains also an aspartic D461 matching with the glucagon D15:

Spatial 3D structure superimposition

Glucagon numbering             15      19     22

Glucagon                                   DSRRAQDF

HCV E2                                       D I K A       F

HCV E2 numbering                   461 464465

 FIG1

HCV genotype classification is based on 5' untranslated region, core, E1, non structural 5B (ns5B). This classification is not based on E2, where is located the glucagon-like sequence.

Among the 2073 HCV sequences studied, the most homologous HCV E2 to glucagon are some HCV E2 genotype 1b; this is accordance with the results of Knobler H (2000) and Rudoni S (1999) who found an increase of HCV genotype 1b in diabetics. However as glucagon-like E2 is not strictly linked to genotypes, the result of Mason AL (1999), who found an increase of HCV genotype 2a, may be also valid. For example, some genotypes 2a has the sequence EDFRIGWGTLQ which is glucagon-like. Moucari R (2008) in France found an association between insulino-resistance and genotype 4: This agrees rather well with the sequence of genotype 4 EDFPQGWGPLT which contains a proline P 471, instead of Leucine L 471,  corresponding to L 26 in glucagon; genotype is also glucagon-like, but to a lesser degree than genotype 1b, thus there is not diabetes, but only insulin-resistance.

Genotype 3 has not been associated with diabetes, but with steatosis (Neuschwander–Tetri BA, 2008). Genotype 3 has a serine S 471 instead of Leucine L 471 and also an aromatic (F, Y) or big (H) residue before F 465, that could induce steric hindrance effect. So genotype 3 does not look like a functional glucagon.

                                                                                               Conclusions

The link between HCV and diabetes is explained by a molecular homology between HCV E2 envelope  (mainly of genotype 1b, to a lesser extent genotype 2a and 4), and human glucagon, especially miniglucagon (19-29), which impairs insulin secretion and induces diabetes. In the case of anti-protease side effect (severe anemia) or resistance to interferon-α ribavirine, treatment of HCV by

high doses of intravenous silymarin from Milk Thistle (silybum marianum), (Ferenci P, 2008; Biermer M, 1999), or

oral silybin-phosphatidylcholine [(Siliphos)(Indena Laboratory)],

intravenous alpha-lipoic acid (or ALA, or thioctic acid)(Berkson B, 1999, 1979) [Reed L and Gunsalus I  isolated only a few milligrams of ALA from many tons of liver tissue in 1953],

Desmodium Adscendens (Dr Tubery Pierre)(Netlab Pharma) from Cameroon,

can counteract HCV-induced diabetes.

ALA is also efficient in diabetes neuropathy (Golbidi S, 2011; Poh ZX, 2009).

 fig2

Milk Thistle (Silibum Marianum)                                                           Desmodium Adscendens

alpha-lipoic acid (ALA or thioctic acid)

                                                                                                  Bibliography

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                                                                    Update (24.3.13)

Whereas there is a consensus on the prevalence of type 2 diabetes among chronic HCV which frequency  (24-50%) is admitted,

on the contrary the HBV diabetes/insulino-resistance link is controversial: It is rare [prevalence of insulino-resistance among HBV is 5% in France (Moucari R, 2008)] or less well documented: We found 3 publications from East Europe (HBV genotype D): Poland [in diabetic children (Korczowski R, 1972)], Czechoslovakia [a study on 788 diabetics (Meluzin F, 1974)], North Moravia (Plesník V, 1976). In South Africa (HBV genotype A), Kew MC (1976) found no association between well controlled Diabetes and HBV.

However, a study in Beirut, Lebanon (a Mediterranean country, genotype D), found that 51% moderately controlled diabetics (versus 25% controls) were HBV+ (p less than 0.001); the controls were themselves hospital personnel, with relatively already high risk HBV exposure (Khuri KG, 1985): Thus, among different HBV geographical genotypes, Mediterranean and East European HBV genotype D seemed more diabetogenic, whereas South African genotype A is not.

Classen JB (1996) found a 60% rise in type 1 diabetes after HBV vaccination. Such a causal link was not accepted in France by Thivolet C (1999) on 28 cases. The general opinion is to vaccinate diabetics, in order to protect them against HBV.

We analyse the mechanism of action of HBV Mediterranean and East European genotype D in diabetes/insulino-resistance production. We propose that diabetes different prevalence may be explained by geographical differences between HBV genotypes.

Methods: Basic Local Alignment Search Tool Protein (BLASTP) comparison between human glucagon and HBV surface antigen HBs. Nucleotidic comparison was assessed by BLASTN (N= Nucleotide).

Results:

Glucagon                                  16-SRRAQDFVQWLM-NT-29

HBV HBs genotype D ayw                   179-FVQWLMGLS-187   (chimera of embl:X77308 and gb AAV90939)

Nucleotidic glucagon      tttgtgcagtggttgatg

HBV HBs                            tttgttcagtggttcatg (embl:X77308)

There is 16/18 (88,89%) nucleotide identity.

The glucagon (1-21) and des-(22-26) glucagon have potencies of <0.0001% and 0.0006% respectively (Frandsen EK, 1985, 1981), pointing to the crucial role of 22-FVQWLMNT-29 COOH-terminus.

The most homologous to glucagon are HBV HBs genotype D subtype ayw4 (gb AAV90939, Siberia/Estonia), ayw (embl X77308, Cagliari, Italy, chronicity), ayw3 (gb AY859852, Madrid, Spain), adw2 (hepatoma) and HBV Chinese subtype adrq+ (gb FJ787441, Bejing, China, chronicity). The diabetogenic HBV is also associated with more severe pathologies: Hepatic transplantation (gb AF289998, Australia), HIV-1 infection (gb KC113409, Brazil), adefovir chemoresistance (gb EU 027323, France).

It is noteworthy that China has 200 millions of diabetics and is also a high HBV prevalence country, and that Chinese HBV genotype (gb FJ787441, subtype adrq+) is found here to be glucagon-like.

As negative controls, other HBV genotypes or subtypes were not homologous to glucagon. For example, genotype A [South Africa, negative study of Kew C (1976) concerning the diabetes-HBV link] is not glucagon-like: This is coherent with the postulate that only glucagon-like HBV are diabetogenic genotype/subtypes.

Conclusion (preliminary): As for HCV, some HBV HBs, but not all of them, seem also implicated in insulino-resistance/diabetes by a molecular homology with mini-glucagon, which is 1000 fold more powerful than glucagon itself. These diabetogenic HBV seem to be genotypes D and C, and are restricted to some geographical areas in the world: Mediterranean area (genotype D) and China (genotype C). Genotype D is also present in other areas (India, East and West Europe, although less frequently in USA). Further studies are needed to precisely clarify this point: An analysis of the glucagon-like sequence, in addition to genotyping, in each diabetes-associated HBV would be necessary.

HBV major group a is based on the HBs sequence 124-147, and HBV subtyping is based on HBs residues 122 (y/d), 126 and 160 (w/r) (Servant-Delmas A, 2007), so they are not strictly linked to the HBs glucagon-like region 179-187, which is located downstream.

 fig3

Implications (preliminary): From our molecular homology, we would perhaps predict the absence [or a low level] of association between Diabetes and HBV in some geographical regions, where only non-diabetogenic (= non glucagon-like) are prevalent, [or associated with diabetogenic glucagon-like HBV]:

1°) no association:

South Africa                                                                                          genotype A (non diabetogenic)

Central Africa                                                                                      genotype E (non diabetogenic, non glucagon-like)

2°) low or variable level of association:

South America, Alaska                                                                   genotype F non diabetogenic, with rarely genotype D diabetogenic

USA                                                                                                             association of 4 genotypes: 2 diabetogenic D and C,

2 non diabetogenic A and B

West Europe                                                                                        association of 2 genotypes: diabetogenic D

and non diabetogenic A

This would be an analysis case by case, for the genotype/subtypes.

Most probably, those with a more severe clinical status/prognosis would be infected by diabetogenic glucagon-like HBV genotype/subtypes: Chronicity, hepatoma, transplantation, adefovir resistance, HIV-1 infection.

The second implication concerns possible side effects of HBV vaccine: It may be possible that in some susceptible individuals, the homology with mini-glucagon would promote the occurence of a diabetes in vaccinated people. Our preliminary data (updated 24.3.13) cannot draw any conclusion for the moment and need further investigation (ongoing) on Recombinax vaccine (subtype adw), Genhevac (subtype ayw) and GenerixB vaccines amino acid sequences.

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